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人胃癌細胞要這怎么冷凍
更新時間:2017-12-26 點擊次數(shù):1255次
   人胃癌細胞;HGC-27培養(yǎng)冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。人胃癌細胞冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
  
  人胃癌細胞細胞形態(tài)生長狀態(tài)良好的細胞,在一般顯微鏡下觀察時可見,細胞透明度大、折光性強、輪廓不清。細胞生長不良時,輪廓增強,胞質(zhì)中常出現(xiàn)空泡、脂滴和其他顆粒狀物,人胃癌細胞之間空隙加大,細胞形態(tài)可變得不規(guī)則甚至失去原有特點,如上皮細胞變成類上皮細胞等。某些染料當細胞死亡時能透過變性的胞膜與解體的細胞核DNA結(jié)合,而令其著色。因而常用臺盼藍鑒別細胞死活,活細胞不著色,死細胞核呈藍色。
  
  人胃癌細胞細胞生長初代培養(yǎng)或傳代的細胞懸液接種以后,經(jīng)過長短不同的潛伏期后開始增殖。傳代細胞系、胚胎組織或幼體組織一般在第二天即可見細胞生長,一周內(nèi)便可連接成片。接種細胞長滿瓶壁后,應(yīng)及時做再培養(yǎng)。否則由于營養(yǎng)物消耗和代謝積累,細胞即進入停止期或退化期。此時細胞輪廓增強,細胞內(nèi)常出現(xiàn)顆粒狀堆積物,為膨脹的線粒體,人胃癌細胞質(zhì)呈空泡化,細胞變圓、粗糙,嚴重時細胞從瓶壁脫落,只有及時再做傳代處理,才能使細胞繼續(xù)生長繁殖。