原位雜交是在DNA分子復(fù)制原理的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種技術(shù)，兩條核苷酸單鏈片段，利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基順序，通過(guò)堿基對(duì)之間非共價(jià)鍵的形成，出現(xiàn)穩(wěn)定的雙鏈區(qū)，形成雜交的雙鏈。我們?yōu)榭蛻籼峁┑奶结樉?jīng)過(guò)臨床驗(yàn)證。
　　
　　原位雜交是用于定位固定組織和細(xì)胞中特定核酸靶標(biāo)的強(qiáng)大技術(shù)，能夠獲得與基因表達(dá)和遺傳位點(diǎn)相關(guān)的時(shí)間和空間信息。雖然原位雜交的基本工作流程與印跡雜交近似，即核酸探針被合成、標(biāo)記、純化和特異性靶標(biāo)退火，但其不同之處在于前者可通過(guò)可視化顯示組織內(nèi)的結(jié)果來(lái)獲得更多信息。如今有兩種基本方法來(lái)實(shí)現(xiàn)可視化顯示原位RNA和DNA靶標(biāo)，即熒光(FISH)和顯色(CISH)檢測(cè)。每種檢測(cè)方法本身的特點(diǎn)使得FISH和CISH適用于截然不同的應(yīng)用。雖然兩種方法均使用標(biāo)記的、與樣本雜交的靶標(biāo)特異性探針，但每種方法用于可視化顯示樣本的儀器不同。
　　
　　原位雜交技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列，將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì)，結(jié)合成專(zhuān)一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測(cè)手段將待測(cè)核酸在組織、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來(lái)。為顯示特定的核酸序列必須具備3個(gè)重要條件：組織、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物。
　　
　　原位雜交的應(yīng)用：
　　
　　①細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位，可用于基因圖譜，基因表達(dá)和基因組進(jìn)化的研究;
　　
　?、诟腥窘M織中病毒DNA/RNA的檢測(cè)和定位，如EB病毒mRNA、人類(lèi)乳頭狀瘤病毒和巨細(xì)胞病毒DNA的檢測(cè);
　　
　?、郯┗?、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測(cè);
　　
　?、芑蛟谌旧w上的定位;
　　
　?、輽z測(cè)染色體的變化，如染色體數(shù)量異常和染色體易位等;
　　
　　⑥分裂間期細(xì)胞遺傳學(xué)的研究，如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定，某些腫瘤的診斷和生物學(xué)劑量測(cè)定等。