由于
結(jié)腸癌耐藥細(xì)胞株在長(zhǎng)期的保存?zhèn)鞔^(guò)程中，受到各種不穩(wěn)定因素影響。例如細(xì)胞遺傳污染和基因變異等。故經(jīng)過(guò)一段時(shí)間之后，腫瘤細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變異，并導(dǎo)致其生物學(xué)特性的改變，從而降低腫瘤動(dòng)物模型的均一性和可比對(duì)性。因此要想保證腫瘤動(dòng)物模型的穩(wěn)定性，必須對(duì)結(jié)腸癌耐藥細(xì)胞株進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控。
腫瘤細(xì)胞實(shí)質(zhì)就是腫瘤。腫瘤組織由實(shí)質(zhì)和間質(zhì)兩部分構(gòu)成，腫瘤實(shí)質(zhì)是腫瘤細(xì)胞，是腫瘤的主要成分，具有組織來(lái)源特異性。它決定腫瘤的生物學(xué)特點(diǎn)以及每種腫瘤的特殊性。通常根據(jù)腫瘤的實(shí)質(zhì)形態(tài)來(lái)識(shí)別各種腫瘤的組織來(lái)源，進(jìn)行腫瘤的分類、命名、和組織學(xué)診斷，并根據(jù)其分化成熟程度和異型性大小來(lái)確定腫瘤的良惡性和腫瘤的惡性程度。腫瘤細(xì)胞有三個(gè)顯著的基本特征即：不死性，遷移性和失去接觸抑制。除此之外，腫瘤細(xì)胞還有許多不同于正常細(xì)胞的生理、生化和形態(tài)特征。
結(jié)腸癌耐藥細(xì)胞株培養(yǎng)：
1.取出小鼠后瀝干酒精，放入超凈臺(tái)內(nèi)，固定在泡沫板上。
2.用鑷子提起皮膚，用解剖剪剪開(kāi)皮膚一個(gè)橫切口，將皮膚向上撕開(kāi)，然后剪開(kāi)肌肉等，暴露出腹腔，在左側(cè)找到脾臟，用彎頭眼科鑷取出脾臟，置于無(wú)菌培養(yǎng)皿中。
3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次，并剔除多余無(wú)用的組織。
4.將篩網(wǎng)置于平皿中，脾臟置于篩網(wǎng)上，用彎頭鑷鑷住，輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨，同時(shí)不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。
5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中，離心(1000rpm,5min)，吸去上清(去除血液等)。
6.加入10ml培養(yǎng)液，吹打混勻，取樣計(jì)數(shù)。
7.將稀釋好的細(xì)胞懸液分裝于培養(yǎng)瓶中，輕輕搖晃混勻，在培養(yǎng)瓶上。
結(jié)腸癌耐藥細(xì)胞株復(fù)蘇步驟：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
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