蛋白質(zhì)組(proteome)一詞它來(lái)源于protein和genome兩個(gè)單詞,它是指一個(gè)細(xì)胞、組織或生物個(gè)體基因組所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)的總和。對(duì)應(yīng)于研究基因組(genome)的基因組學(xué)(genomics),
蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)則是研究蛋白質(zhì)組(proteome)的科學(xué)。
蛋白質(zhì)組學(xué)是指系統(tǒng)研究某一基因組所表達(dá)的所有蛋白質(zhì),包括組成蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的氨基酸序列,蛋白質(zhì)的豐度,蛋白質(zhì)的修飾以及蛋白質(zhì)之間的相互作用。
蛋白質(zhì)組學(xué)通常被認(rèn)為是在基因組學(xué)和轉(zhuǎn)錄組學(xué)之后,生物系統(tǒng)研究的下一步。然而,蛋白質(zhì)組的研究遠(yuǎn)比基因組學(xué)復(fù)雜,這是由于蛋白質(zhì)內(nèi)在的復(fù)雜特點(diǎn),如蛋白質(zhì)各種各樣的翻譯后修飾所決定的。
現(xiàn)階段市面上流行的應(yīng)用較廣的蛋白質(zhì)組學(xué)解決方案共有4中:TMT、iTRAQ、DIA和Label-free,這幾種研究策略具有不同特點(diǎn)。
TMT/iTRAQ:
1、分離能力強(qiáng):可分離出酸/堿性蛋白,小于10KD或大于200KD的蛋白、難溶性蛋白等;
2、適用范圍廣:可以對(duì)任何類型的蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定,包括膜蛋白、核蛋白和胞外蛋白等;
3、高通量:可同時(shí)對(duì)多個(gè)樣本進(jìn)行分析,特別適用于采用多種處理方式或來(lái)自多個(gè)處理時(shí)間的樣本的差異蛋白分析;
4、結(jié)果可靠:定性與定量同步進(jìn)行,同時(shí)給出每一個(gè)組分的相對(duì)表達(dá)水平、分子量和豐富的結(jié)構(gòu)信息;
5、自動(dòng)化程度高:液質(zhì)聯(lián)用,自動(dòng)化操作,分析速度快,分離效果好。
Label_free:
1、無(wú)需標(biāo)記,操作簡(jiǎn)單;
2、不受比較樣品數(shù)限制,可進(jìn)行大批量的樣本檢測(cè);
3、對(duì)實(shí)驗(yàn)操作穩(wěn)定性、重復(fù)性要求高;
4、準(zhǔn)確性較標(biāo)記定量略低;
5、前處理少,更多保留樣本最原始信息;
6、對(duì)于低豐度多肽的覆蓋程度更高;
DIA:
1、重復(fù)性好:DIA數(shù)據(jù)完整性為98%,DDA數(shù)據(jù)完整性為49%;
2、鑒定敏感度高,能鑒定更多低豐度蛋白;
3、定量準(zhǔn)確性高,定量準(zhǔn)確度與MRM技術(shù)相當(dāng),CV值可達(dá)10%左右;
4、通量高,無(wú)需同位素標(biāo)記;
5、數(shù)字化蛋白信息,可回溯;
6、樣本量大:DIA技術(shù)可以在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)對(duì)幾十、上百例樣本進(jìn)行差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行分析。