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細胞侵襲

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更新時間: 2017-08-02

細胞侵襲
將細胞種于上室,趨化因子等種于下室,細胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑。與遷移實驗不同是侵襲實驗需要在小室聚碳酸酯膜上鋪設(shè)一層基質(zhì)膠。用以模仿體內(nèi)細胞外基質(zhì),細胞欲進入下室,先要分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)將基質(zhì)膠降解,方可通過聚碳酸酯膜。計數(shù)進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的侵襲能力。

產(chǎn)品介紹:

細胞侵襲

服務(wù)目的:

研究趨化因子或其他營養(yǎng)物質(zhì)對細胞侵襲的影響
服務(wù)原理:

將細胞種于上室,趨化因子等種于下室,細胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑。與遷移實驗不同是侵襲實驗需要在小室聚碳酸酯膜上鋪設(shè)一層基質(zhì)膠。用以模仿體內(nèi)細胞外基質(zhì),細胞欲進入下室,先要分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)將基質(zhì)膠降解,方可通過聚碳酸酯膜。計數(shù)進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的侵襲能力。

客戶提供:

1.提供檢測樣本的樣本信息、檢測應(yīng)用及檢測時間點等;

2.若客戶提供細胞:25T細胞培養(yǎng)瓶,灌滿培養(yǎng)基新鮮運輸或提供細胞凍存管,干冰運輸

服務(wù)流程

  1. matrigel在4℃過夜融化
    2. 稀釋matrigel至終濃度1mg/ml
    3. 在chamber上室底部中央垂直加入稀釋后的matrigel。37℃溫育4-5 h
    4. 所有細胞培養(yǎng)試劑和Transwell chamber放在37℃恒溫水浴箱溫育
    5. 消化培養(yǎng)至對數(shù)期的細胞,用無血清培養(yǎng)基懸浮細胞,計數(shù),調(diào)整濃度為5*105/ml
    6. 在下室加入含20%血清的培養(yǎng)基。上室加入細胞懸液,37 ℃、5%CO2、飽和濕度條件下繼續(xù)培養(yǎng)24 h
    7. 取出chamber,吸干上室液體,移到預(yù)先加入甲醇的孔中,室溫固定30min
    8. 取出chamber,吸干上室固定液,移到預(yù)先加入結(jié)晶紫染液的孔中,室溫染色            15-30min;用PBS沖洗浸泡數(shù)次,取chamber,先用干棉簽將上室內(nèi)液體吸去,再用棉簽輕輕擦Matrigel凝膠和聚碳酯膜上表面的細胞
    9. 揭下膜表面上的細胞,晾干,封片
    10. 顯微鏡下計數(shù),統(tǒng)計結(jié)果;(若不用保存底膜,可省去步驟9)

 

收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。

【本公司合作項目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學(xué)實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學(xué)實驗等,能夠進行藥效學(xué)評價、毒理學(xué)評價、細胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)!

【公司】www.mxbio.cn
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