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更新時(shí)間: | 2020-07-13 |
上海美軒生物科技有限公司是專門從事細(xì)胞培養(yǎng)和技術(shù)服務(wù)的高技術(shù)企業(yè),和諧的團(tuán)隊(duì),完善的設(shè)備,*的技術(shù)為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。目前可提供多種細(xì)胞株和耐藥細(xì)胞株,優(yōu)惠的價(jià)格,高質(zhì)量的售后,是廣大客戶的*Z求,歡迎科研工作者選購(gòu)。A549/Taxol-LUC人肺癌-熒光素酶標(biāo)記
品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | MXC773 |
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規(guī)格 | 25cm2 | 供貨周期 | 一個(gè)月 |
主要用途 | 科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
A549/Taxol-LUC人肺癌紫杉醇耐藥株-熒光素酶標(biāo)記操作步驟:
請(qǐng)收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
(一)如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二) (二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1.棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。
如果沒(méi)有特別說(shuō)明,收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
注:1、觀察細(xì)胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度??醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)及時(shí)與我們。